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高通量破碎動植物組織和微生物

更新時間:2015-05-26   更新時間:2015-05-26   點擊次數(shù):3259次

       破碎大量樣品、低溫破碎大量樣品、破碎堅硬或韌性較強的樣品時,人工手動研磨就成了實驗猿的噩夢。當然,也有很多實驗猿已經(jīng)嘗試過市面一些研磨機/超聲波粉碎機,發(fā)現(xiàn)自己那頑固的樣品依然無法被破碎/破碎過程損壞了目標成分而十分心塞。

       分享個高通量破碎動植物組織和微生物的方法,別逗,當然不是靠徒手研磨能做到的,必須入手個神器——上海凈信的tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多樣品組織研磨機。對于動植物組織和微生物,包括一些難以破碎的組織樣品,都可以使用這個研磨機對其進行粉碎。

    特別地,一些尤其堅硬/韌性比較強的樣品,或要求維持低溫條件進行破碎提取的樣品,需要結(jié)合液氮進行研磨,如:皮膚、硬骨骼、軟骨、血管、結(jié)締組織、種子等;使用普通機械研磨方法,很難既保證研磨破碎效果又保證樣品一直處于低溫狀態(tài),尤其是提取RNA、酶等對溫度敏感的物質(zhì)時,低溫狀態(tài)的控制顯得尤為關(guān)鍵。入手一臺上海凈信的多樣品組織研磨機,這些都不再是問題了??凑校?/span>

注:由于樣品的具體差異及實驗要求的不同,下文數(shù)據(jù)部分請咨詢廠家。

*部分 破碎動物組織

1)樣品:豬肌肉組織

2)儀器: Tissuelyser多樣品組織研磨機(品牌:上海凈信);

耗材:***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠

3)步驟:

a.取***克左右肌肉組織樣品,均勻地剪切成少量樣品塊,分別放入若干***毫升的研磨離心管中。

b.每個試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠和800μL PBS裂解液,分別蓋緊管蓋后,置入24孔研磨適配器中,再將適配器固定在研磨機中。

c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機的參數(shù)設(shè)置為***赫茲,研磨***秒,啟動研磨器。

d.研磨停止后,拿出研磨離心管,旋開管蓋,取出研磨好的肌肉組織樣品。

4)結(jié)果:

研磨后的效果如圖1,豬肌肉組織成很細膩的泥漿狀,說明Tissuelyser多樣品組織研磨機對豬肉組織的研磨效果良好。


圖1 豬肌肉研磨對比

第二部分 破碎植物組織

1)樣品:水稻葉片

2)儀器: Tissuelyser多樣品組織研磨機(品牌:上海凈信);

耗材:***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠

3)步驟:

a.取***克左右葉片組織樣品,均勻地剪切成少量樣品塊,分別放入若干***毫升的研磨離心管中。

b.每個試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠,分別蓋緊管蓋后,置入24孔研磨適配器中,再將適配器固定在研磨機中。

c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機的參數(shù)設(shè)置為***赫茲,研磨***秒,啟動研磨器。

d.研磨停止后,拿出研磨離心管,旋開管蓋,取出研磨好的葉片組織樣品。

4)結(jié)果:

研磨后的效果如圖2,葉片組織成很細膩的泥漿狀,說明Tissuelyser多樣品組織研磨機對葉片組織的研磨效果良好。順帶附上研磨黃豆(堅硬的植物種子)的研磨對比圖。


圖2 水稻葉片研磨對比


圖3 黃豆研磨對比

第三部分 結(jié)合液氮使用凈信tissuelyser研磨機

    當樣品死活無法破碎/樣品傲嬌要低溫環(huán)境時,上海凈信Tissuelyser多樣品組織研磨機+液氮=問題輕松解決。以血管和植物葉片為例,具體操作方法如下:

 血管:

    取0.1克新鮮血管,用剪刀剪成若干小塊,然后放入2毫升離心管中,加入1顆6mm研磨鋼珠,蓋上管蓋。將整個試管放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰,然后放入機器處理30秒鐘。取出樣品管可見樣品被破碎成乳白色粉末,然后加入提取緩沖液,可以進行接下來的后續(xù)提取,加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下。

 葉片:

    取0.2克植物葉片,清潔葉片表面后放入離心管中,加入1顆直徑5mm不銹鋼研磨鋼珠,蓋上管蓋。將整個試管和適配器放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰,然后取出放入研磨機器中機器處理30秒鐘。取出樣品管可見葉片被破碎成綠色粉末,然后加入提取緩沖液,進行接下來的后續(xù)提取即可,加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下。


后記

       想入手這個神器,但又對研磨效果有所猶疑的小伙伴,現(xiàn)在上海凈信部分研磨機產(chǎn)品可申請試用,是時候下手了。激動人心的還有,近期研磨機好價,試用爽了直接入手一臺也是毫不含糊的。詳情可致電或,亦可瀏覽http://www.tissuelyser。。com/了解更多。

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